产品货号：
BM0310
中文名称：
Taq DNA连接酶
英文名称：
Taq DNA Ligase
产品规格：
1000U
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1～3天
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Taq DNA Ligase是一种耐高温连接酶，它能催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5'-磷酸和3'-羟基之间形成磷酸二酯键。该催化反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶DNA完全配对，且两条寡核苷酸链之间没有间隙的条件下才会发生。因此，可以用于单碱基替换检测。Taq DNA Ligase以NAD+为辅酶因子，在45～65℃范围内均有活性。
在50μL反应体系中，45℃条件下温育15min能使50%的1μg经BstEII消化的λDNA片段发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。
酶活检测条件：
将DNA底物(20μg/mL)和1×Taq DNA Ligase反应缓冲液45℃温育15min，加入终止染液（50%甘油，50mM EDTA和溴酚兰）终止反应，70℃加热10min后经0.7%琼脂糖凝胶电泳，由于连接反应，经BstEII消化的λDNA粘端在70℃温育后仍将保持在一起。
| 组分 | 规格 |
| Taq DNA Ligase(40U/μL) | 25μL |
| 10×Taq DNA Ligase Buffer | 1mL |
保存：-20℃
- 核酸内切酶残留测试：在反应体系中加入超螺旋的DNA底物，孵育4h，经琼脂糖凝胶电泳，无肉眼可见的环状切口DNA出现。
- 核酸外切酶残留检测：将酶液与双链DNA底物在37℃温育16h，通过DNA电泳检测双链DNA底物无变化。
- 宿主检测：将酶液中残留的核酸经E.coli 16S rDNA特异性的TaqMan qPCR检测，E.coli基因组残留低于10拷贝。
- 于冰上配制如下反应体系：
成分 用量 DNA up to 1μg 10×Taq DNA Ligase Buffer 5μL Taq DNA Ligase 2μL ddH2O 至50μL - 充分混匀并瞬离，45℃温育15min；
- 加入终止液（50%甘油，50mM EDTA和溴酚兰）终止反应，不可热失活。
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